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TRITC-Dextran 4 (TD4) TRITC標記葡聚糖(4 kDa)

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產品介紹

TRITC-Dextran 4 (TD4) TRITC標記葡聚糖(4 kDa)

產品描述

TRITC標記葡聚糖(TRITC-Dextran)是以天然葡聚糖B512F限制水解和分級純化制備的不同分子量葡聚糖為底物,經四甲基羅丹明B(TRITC)標記所得的合成探針。羅丹明基團通過一個穩定的硫代氨甲酰鍵連接到葡聚糖上(見附錄圖1. TRITC-Dextran分子片段的結構特征),此標記步驟不會引起任何的葡聚糖降解。TRITC-Dextran內每個葡萄糖單位含0.001~0.008 mol TRITC,這一低水平的替換確保葡聚糖最小的結構變化,這一特性對滲透性研究來說是最基本需求。

TRITC標記葡聚糖(TRITC-Dextran)主要用于細胞、血管和組織內的滲透性和轉運研究。另一好處在于為健康和病理組織的轉運和滲透性提供定量數據。這些研究能通過活體熒光顯微鏡技術進行實時觀察,這一技術具有高靈敏度,組織液內低至1μg/ml的濃度都能檢測到。不同于FITC-Dextran,TRITC-Dextran的熒光不依賴于pH范圍(4-9)。另外一個重要特征是TRITC-Dextran不會與動脈壁結合。

本品是對平均分子量約4 kDa葡聚糖進行標記的羅丹明衍生物,即羅丹明標記葡聚糖4(TRITC-dextran, TD4),以凍干粉形式提供,易溶于水,最大激發和發射波長分別為550和572nm。

產品特性

1) 化學名:Dextran 3′,6′ bis(tetramethylamino)-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H),9′-[9H]xanthen]-5(or 6)-yl)carbamothioate, average Mw of approximately 4,000

2) 同義名:Tetramethyl-rhodamine B-dextran 4; Tetramethyl-rhodamine B thiocarbamoyl-dextran 4; 四甲基羅丹明B標記的葡聚糖4;羅丹明標記葡聚糖,分子量4,000;TRITC標記葡聚糖(分子量4000);TRITC-葡聚糖(分子量4 kDa);

3) 分子量:average Mw 3,000-5,000

4) 置換率:0.001~0.008 mol TRITC/glucose unit

5) 外觀:粉色至紅色粉末
6) 溶解性:易溶于水或鹽溶液,也溶于DMSO,甲酰胺和某些其他極性有機溶劑,不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和DMF
7) 光譜特性:Ex/Em=550/572nm【我司實驗室測試發現TRITC-Dextran溶液在pH 3-9的范圍內熒光僅發生微小變化,見附錄圖2。進行定量檢測時這一特征值得關注。對生物培養基的測定可能pH會明顯改變熒光強度,或加強,或抑制。】

8) 生化特性:分子量≥5 kDa的葡聚糖分子在溶液中呈現出可變和伸直線團的特征,見附錄表3,各種分子量葡聚糖的分子尺寸。

保存與運輸方法

保存:室溫避光短期保存,2-8℃避光長期保存,保持密封干燥,至少3年穩定。 

運輸:室溫運輸。

產品穩定性

TRITC-Dextrans的穩定性目前未做詳細的測定,但從結構推測其穩定性類似于FITC-Dextrans。僅當pH>9和上升溫度內熒光素可能存在水解的風險。硫代氨甲酰鍵的水解產生4-或5-氨基羅丹明,能即可被HPLC檢測到。

兔血漿、肌肉勻漿液、肝臟勻漿液和尿液內的FITC-Dextrans在37℃,至少3天內保持穩定,分子量不會發生變化,且未發現熒光素基團的釋放。6%三氯乙酸內FITC-Dextrans室溫穩定保存3天。【文獻來源:①P. Kurtzhals, C. Larsen and M. Johansen, High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】

未發表的研究數據顯示,將高壓處理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃長達5個月,發現僅在50℃情況下可能觀察到微量(1%)的自由氨基熒光素含量增加。其他的未發表研究顯示,FITC-Dextrans在pH4溶液35℃內能穩定保存高達1年。而在pH4,80℃內硫代氨甲酰鍵穩定30min,不過,可能觀察到葡聚糖開始降解的跡象。pH9,36℃內存放一個月以上會發生一定量(24%)的熒光衰減。

注意事項

1) TRITC-Dextrans易溶于水或鹽溶液,可根據實際使用濃度配制適當濃度的母液。

2) TRITC-Dextrans高壓滅菌可能導致少量氨基羅丹明的釋放,若需要無菌,建議用過濾的方法來除菌。

3) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

附錄

圖1. TRITC-Dextran分子片段的結構特征

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